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抗坏血酸(Ascorbic Acid)定量测定试剂盒

时间:2018-02-25 02:40:57来源:本站 作者:admin 点击:331次
抗坏血酸定量检测试剂盒
产品编号 产品名称 试剂组成 包装
BCOS-001 抗坏血酸定量检测试剂盒 抗坏血酸标准品(10mM)0.2ml/支 96次
100×混合酶浓缩液 0.2ml/支
100×底物浓缩液 0.2ml/支
检测缓冲液 50ml/瓶
 
产品信息:
维生素C英语:Vitamin C,又称L-抗坏血酸)是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素抗坏血酸在大多的生物体可借由新陈代谢制造出来,但是人类是最显著的例外。最广为人知的是缺乏维生素C会造成坏血病。在生物体内,维生素C是一种抗氧化剂,保护身体免于自由基的威胁,维生素C同时也是一种辅酶。其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果
百智生物生产的抗坏血酸定量检测试剂盒采用原理为:抗坏血酸在抗坏血酸氧化酶作用下生成过氧化氢(H2O2);然后,过氧化物酶(POD)催化过氧化氢使色原底物生成粉色醌亚胺类化合物,颜色的深浅与抗坏血酸含量成正比。而该产物在500-520nm处有最大吸收峰,因此可以用该方法对各种动物的血清、浆及尿液等样本中的抗坏血酸进行定量。
 
保存条件:
 -20℃保存,半年有效。
 
注意事项:
     本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 
 
使用说明:
1.试剂准备:将所有试剂取出,平衡至室温使用。 
2.样品准备:
a.血浆的准备:(1)用枸橼酸或肝素管收集全血,切忌使用EDTA管。(2)1000g 4℃离心全血10min,移液器吸取顶部的黄色血浆层,千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存;如不,需冻存至-80℃。(3)由于血浆中抗坏血酸的含量较低可直接加样检测。
b.血清的准备:(1)使用不含抗凝剂的采血管收集全血, 25℃自然凝结30min。(2)2000g 4℃离心全血15min,移液器吸取顶部的黄色血清层,千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存;如不,需冻存至-80℃,一个月有效。(3)由于血清中抗坏血酸的含量较低可直接加样检测。
c.组织和细胞的准备:组织和细胞需要添加冷1×PBS进行匀浆,然后14000rpm 4℃离心5min,取上清进行测定。
3.1mM的抗坏血酸工作标准品配制:在180μl检测缓冲液中加入20μl抗坏血酸标准品(10mM),充分混匀即可。
4.反应工作液的配制:根据样品数量,按100体积检测缓冲液中分别加1体积100×混合酶浓缩液和100×底物浓缩液配制适量反应工作液,充分混匀,需在1小时内使用。
5.在96孔板内按照下表对板孔进行编号及加样:
  空白管 标准品管 样品测定管
检测缓冲液 20μl / /
工作标准品 / 20μl /
待测样品 / / 20μl
反应工作液 200μl 200μl 200μl
   按照上表加完后,将微孔板置37℃温箱内孵育15min,到时间后取出微孔板放入酶标仪内500-520nm处处进行读值。
6.样品中抗坏血酸的定量计算:
样本抗坏血酸含量(mg/dl)=(待测样品OD值-空白OD值)/(工作标准品OD值-空白OD值)×工作标准品浓度(1mM)×n(稀释因子)

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