过氧化物酶定量检测试剂盒

产品编号	产品名称	试剂组成	包装
BCOS-002	过氧化物酶定量检测试剂盒	浓缩过氧化物酶50μl/支	96次
		试剂A液 10ml/支
		试剂B液10ml/支
		检测缓冲液 50ml/瓶

 
产品信息：
过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶，是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。它们能催化很多反应，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。其最早由J.Rhodin于1954年在鼠肾小管上皮细胞中发现。
百智生物生产的过氧化物酶定量检测试剂盒采用原理为：过氧化物酶(POD)催化过氧化氢使色原底物生成蓝色醌亚胺类化合物，颜色的深浅与过氧化物酶含量成正比。而该产物在650nm处有最大吸收峰，因此可以用该方法对各种动物的血清、浆及尿液等样本中的过氧化物酶进行定量。
 
保存条件：
 -20℃保存，半年有效。
 
注意事项：
     本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 
   切勿使用溶血的样品进行检测。
 
使用说明：
1.试剂准备：将所有试剂取出，平衡至室温使用。 
2.样品准备：
a.血浆的准备：（1）用枸橼酸或肝素管收集全血，切忌使用EDTA管。（2）1000g 4℃离心全血10min，移液器吸取顶部的黄色血浆层，千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存；如不，需冻存至-80℃。（3）由于血浆中过氧化物酶的含量较低可直接加样检测。
b.血清的准备：（1）使用不含抗凝剂的采血管收集全血， 25℃自然凝结30min。（2）2000g 4℃离心全血15min，移液器吸取顶部的黄色血清层，千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存；如不，需冻存至-80℃，一个月有效。（3）由于血清中过氧化物酶的含量较低可直接加样检测。
c.组织和细胞的准备：组织和细胞需要添加冷1×PBS进行匀浆，然后14000rpm 4℃离心5min，取上清进行测定。
3.10U/L的过氧化物酶标准品：在180μl检测缓冲液中加入10μl浓缩过氧化物酶，充分混匀即可，配制好的标准品需在2小时内用完。
4.在96孔板内按照下表对板孔进行编号及加样：

	空白孔	标准品孔	样品测定孔
检测缓冲液	10μl	10μl	/
待测样品	/	/	10μl
试剂A液	100μl	100μl	100μl
试剂B液	100μl	100μl	100μl

   按照上表加完后，将微孔板置37℃孵育15min，到时间后取出微孔板放入酶标仪内650nm处进行读值。
6.样品中过氧化物酶的定量计算：
样本过氧化物酶含量（U/L）=（样品孔OD值-空白孔OD值）/（标准品孔OD值-空白孔OD值）×10×n（稀释因子）