20×DAB显色液 WB019
时间:2018-01-13 04:10:27来源:本站 作者:admin 点击:370次
产品简介:
产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
WB019-20 |
20×DAB显色液 |
20ml |
88元 |
WB019-60 |
20×DAB显色液 |
60ml |
249元 |
WB019-100 |
20×DAB显色液 |
100ml |
379元 |
WB019-200 |
20×DAB显色液 |
200ml |
698元 |
百智生物生产的20×DAB显色试剂液(20×DAB Horseradish Peroxidase Color Development Solution)是一种可被辣根过氧化物酶(HRP)催化的底物,其在辣根过氧化物酶的催化下,会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇,因此可用于免疫组化显色、原位杂交显色、Western、Southern和Northern等膜显色。
用于免疫组化或原位杂交时,如果每个片子使用0.2毫升显色液,那么本试剂盒共可以检测100个片子。
使用说明:
1.、对于组织切片、细胞样品或膜,在与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用
适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成DAB显色工作液:
DAB显色液A |
950μl |
9.5ml |
DAB显色液B |
50μl |
0.5ml |
DAB显色工作液 |
1ml |
10ml |
3、最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量DAB显色工作液,确保能充分覆盖样品。
4、室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
5、去除DAB显色工作液,用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
6、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining
solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
推荐的抗体使用浓度:
抗体 |
一抗(1mg/ml) |
HRP标记二抗(1mg/ml) |
推荐稀释度 |
1:200~1:2000 |
1:500~1:5000 |
注意事项:
1. 背景显色太深。
a. 在免疫组化时如果背景显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液
或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,请注意选购经过适当吸附的二抗,以减小
二抗的非特异性吸附。
b. 在免疫组化时如果背景显色太深,需注意灭活内源性过氧化氢酶。可以在4体积甲醇中加入1体积3%过 氧化氢,混匀后用于内源性过氧化氢酶的灭活。
c. 可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所
帮助。
2. 没有显色或显色太弱。
a. 可以考虑适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在膜上,检测二抗是否可以被
正常显色。
b. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。
c. 可以适当延长显色时间,另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。
保存条件:4℃避光保存,半年有效;-20℃保存,一年有效。
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