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20×DAB显色液 WB019

时间:2018-01-13 04:10:27来源:本站 作者:admin 点击:370次

产品简介:

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
WB019-20 20×DAB显色液 20ml 88元
WB019-60 20×DAB显色液 60ml 249
WB019-100 20×DAB显色液 100ml 379
WB019-200 20×DAB显色液 200ml 698元

   百智生物生产的20×DAB显色试剂液(20×DAB Horseradish Peroxidase Color Development Solution)是一种可被辣根过氧化物酶(HRP)催化的底物,其在辣根过氧化物酶的催化下,会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇,因此可用于免疫组化显色、原位杂交显色、Western、Southern和Northern等膜显色。

用于免疫组化或原位杂交时,如果每个片子使用0.2毫升显色液,那么本试剂盒共可以检测100个片子。
 
使用说明:
1.、对于组织切片、细胞样品或膜,在与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用
适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成DAB显色工作液:
DAB显色液A 950μl 9.5ml
DAB显色液B 50μl 0.5ml
DAB显色工作液 1ml 10ml
 
3、最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量DAB显色工作液,确保能充分覆盖样品。
4、室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
5、去除DAB显色工作液,用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
6、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining 
   solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
 
推荐的抗体使用浓度:
    
抗体 一抗(1mg/ml) HRP标记二抗(1mg/ml)
推荐稀释度   1:200~1:2000  1:500~1:5000
                             

         

注意事项:
1. 背景显色太深。
   a. 在免疫组化时如果背景显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液
    或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,请注意选购经过适当吸附的二抗,以减小
      二抗的非特异性吸附。
   b. 在免疫组化时如果背景显色太深,需注意灭活内源性过氧化氢酶。可以在4体积甲醇中加入1体积3%过 氧化氢,混匀后用于内源性过氧化氢酶的灭活。
   c. 可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所
      帮助。
2. 没有显色或显色太弱。
   a. 可以考虑适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在膜上,检测二抗是否可以被
      正常显色。
   b. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。
   c. 可以适当延长显色时间,另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。
 
保存条件:4℃避光保存,半年有效;-20℃保存,一年有效。


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