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Rat VEGF ELISA Kit

时间:2016-07-19 08:52:22来源:本站 作者:admin 点击:194次


【项目简介】
VEGF 是刺激血管内皮细胞增殖和移行的重要因子,并可影响血管的通透性,因此也称为血管通透因子(VPF)。VEGF(VPF)是一个具有高度保守性,由两个相同亚基(Mr 23000)以二硫键交联结合成的二聚体糖蛋白。VEGF 有四种不同变异体,在人类细胞中其氨基酸残基数为121,165,189 及206。 这四种变异是由于mRNA 剪接差异所至,其中121,165个氨基酸残基者易至靶细胞,而余者多在细胞外基质中。 其基因定位于第六对染色体长臂,包括交替剪接的8个外显子和7个内含子,这几型VEGF 生物活性相近,但单体无生物活性。VEGF 189 及VEGF 206 与肝素结合力强而VEGF 121 于肝素结合力弱,VEGF 165 则介乎其间,这也是为什么VEGF 189 及VEGF 206 主要分布于细胞外基质中的缘故。研究证实血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血管生成关系密切,在临床上与肿瘤病人的进展及复发有关。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗大鼠VEGF抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的大鼠VEGF会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗大鼠VEGF抗体可与被酶标板捕获的大鼠VEGF结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗大鼠VEGF抗体+大鼠VEGF+生物素化抗大鼠VEGF抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,大鼠VEGF浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中大鼠VEGF的浓度。


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