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Rat EGF ELISA Kit

时间:2016-10-27 05:02:41来源:本站 作者:admin 点击:185次


【项目简介】
表皮生长因子为EGF大家族成员,该家族包括TGF-α,双调蛋白,β-细胞素, 表皮调节素, 肝素结合表皮生长因子(HB-EGF) ,表原(epigen),神经调节素1-6(NRG)。EGF家族成员均含有一个EGF样结构基序,以6个间隔的保守半胱氨酸形成的分子内二硫键为特征。所有EGF家族成员均以I型跨膜前体蛋白合成,可能含有多个胞外EGF结构域。成熟的EGF蛋白通过受控的蛋白水解作用,从细胞表面释放出来。含有1133个氨基酸残基的大鼠EGF前体蛋白有多个EGF结构域和LDLR B类重复序列。成熟的蛋白由53个氨基酸组成,通过水解去除近跨膜区的EFG结构域而产生。成熟的大鼠EGF与人和小鼠EGF分别具有70%和77%的序列相似性。EGF存在于多种体液中,包括血液、乳汁、尿液、唾液、精液、胰液、脑脊液、羊水等。四种ErbB (HER)家族受体酪氨酸激酶包括EGFR/ErbB1,ErbB2,ErbB3 and ErbB4参与介导应答EGF家族成员。EGF的生物学活性主要包括促进上皮细胞分裂增殖、血管发生、抑制胃酸分泌、促进成纤维细胞增殖、促进上皮细胞培养 中的集落形成等。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠EGF抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠EGF会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠EGF抗体可与被酶标板捕获的小鼠EGF结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠EGF抗体+小鼠EGF+生物素化抗小鼠EGF抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠EGF浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠EGF的浓度。


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