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Rat IL-1β ELISA kit

时间:2016-07-19 05:53:25来源:本站 作者:admin 点击:287次


【项目简介】
IL-1用以命名两个由不同基因编码的多效性细胞因子—IL-1α (IL-1F1) 和IL-1β (IL-1F2)。IL-1α 和IL-1β为结构上相关的多肽,在大鼠中大约具有26%的氨基酸序列同一性。多种细胞在应答炎症反应物质、感染和微生物内毒素时,产生这两种蛋白质。IL-1α 和IL-1β受独立的调控,虽然它们结合相同的受体,行使相同的生物学效应。IL-1RI直接与IL-1α或IL-1β结合,然后与IL-1R辅助蛋白(accessory protein)IL-1R3/IL-1R AcP偶联形成一个高亲合力的受体复合物,从而进行信号传导。IL-1 RII对IL-1β具有较高的亲合性,但作为诱捕受体(decoy receptor)发挥功能,负调控IL-1β的活性。IL-1ra作为竞争性抑制剂发挥作用,阻止IL-1α 和 IL-1β与IL-1 RI相互作用。大鼠IL-1β的cDNA编码一个由268个氨基酸残基组成的前体蛋白,116个氨基酸残基在胞内由半胱氨酸蛋白酶IL-1β-转换酶(Caspase-1/ICE)切割,产生具有活性的细胞因子。17kDa的成熟大鼠IL-1β与棉鼠和小鼠的IL-1β具有90%的氨基酸序列同一性,与犬、马、猫、人、猪和猴的IL-1β具有65%-78%的同一性。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗大鼠IL-1β抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的大鼠IL-1β会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗大鼠IL-1β抗体可与被酶标板捕获的大鼠IL-1β结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗大鼠IL-1β抗体+大鼠IL-1β+生物素化抗大鼠IL-1β抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,大鼠IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中大鼠IL-1β的浓度。


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