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脂肪酶(Lipase)定量测定试剂盒

时间:2018-02-25 11:07来源:未知 作者:admin 点击:
脂肪酶(Lipase)定量测定试剂盒 96T 500元(货号BCEA006-96)
脂肪酶定量检测试剂盒
产品编号 产品名称 试剂组成 包装
BCEA006 脂肪酶定量检测试剂盒 脂肪酶标准品(450μM)0.2ml/支 96次
         底物液 20ml/瓶
 
产品信息:
 脂肪酶主要来源于胰腺。血清LPS得到增高常见于急性胰腺炎及胰腺癌,偶见于慢性胰腺炎。急性胰腺炎时血清淀粉酶增高时间较短,而血清LPS的升高可持续10-15天。腮腺炎时,LPS通常在正常范围,因而LPS对急性胰腺炎的研究更具有特异性。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸,通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶是分解脂肪的酶,测定血清脂肪酶主要用于对急性胰腺炎的研究。
百智生物生产的总一氧化氮定量检测试剂盒采用原理如下:甘油三脂和水制成的乳胶,因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。底物在脂肪酶作用下发生水解,使胶束分裂,散射光或浊度因而减低,减低的速率与脂及酶活力有关,可以测定各种动物的血清、浆和组织中的脂肪酶含量。
 
保存条件:
 2-8℃保存,半年有效。
 
注意事项:
     本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 
 
使用说明:
1. 试剂准备:将所有试剂取出,平衡至室温使用。 
2. 样品准备
a.血浆的制备:(1)用EDTA或肝素管收集全血,切忌使用枸橼酸管。(2)1000g 4℃离心全血10min,移液器吸取顶部的黄色血浆层,千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存;如不,需冻存至-80℃。(3)血浆可直接加样进行检测,如果含量过高可再用生理盐水稀释检测。
b.血清的制备:(1)使用不含抗凝剂的采血管收集全血, 25℃自然凝结30min。(2)2000g 4℃离心全血15min,移液器吸取顶部的黄色血清层,千万不要碰触影响到白色至浅黄色的薄层。如当天检测可2-8℃保存;如不,需冻存至-80℃,一个月有效。(3)血浆可直接加样进行检测,如果含量过高可再用生理盐水稀释检测。
c.组织匀浆的制备:(1)使用PH=7.4的冷PBS溶液漂洗组织,洗去所有的红细胞及血块。(2)剪碎组织,按5ml/g组织的量加入20mM PH=7.4 PBS缓冲液进行组织匀浆,然后10000g 4℃离心10min。(3)吸取匀浆上清可直接加样进行检测,如果含量过高可再用PBS稀释检测。
3.在96孔板内按照下表对板孔进行编号及加样:
  空白孔 标准品孔 样品测定孔
去离子水 5μl    
450μM标准品作液 / 205μl /
待测样品 / / 5μl
底物液 200μl / 200μl
 
   按照上表加完后,封上盖板膜将微孔板放入37℃温箱孵育10min,然后取出放入酶标仪内420nm处进行读值。
4.样品中脂肪酶的定量计算:
血清、浆脂肪酶(U/L)=(样品孔OD值-空白孔OD值)/(标准品孔OD值-空白孔OD值)×标准品浓度(450μM)×4.1×n(稀释因子)
组织脂肪酶(U/g total protein)=(样品孔OD值-空白孔OD值)/(标准品孔OD值-空白孔OD值)×标准品浓度(450μM)×4.1×n(稀释因子)/组织匀浆上清蛋白浓度(g/L)

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