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Mouse MCP-1 ELISA Kit

时间:2016-07-19 03:34:12来源:本站 作者:admin 点击:331次


【项目简介】
单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2),亦称为单核细胞趋化和激活因子(MCAF), 属于趋化因子超家族中CC亚组成员。MCP-1对单核/巨噬细胞具有强的趋化和激活作用。MCP-1可被多种炎症介质如LPS, IL-1beta, TNF-alpha, IFN-gamma, IL-6, IL-4 等诱导。研究表明多种类型的细胞可产生MCP-1,包括单核细胞、肥大细胞、T细胞、成骨细胞、成纤维细胞、内皮细胞、骨髓基质细胞、上皮细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞等。MCP-1的受体为G蛋白偶联受体CCR2。MCP-1体外诱导的趋化作用可被百日咳毒素阻断,由此表明与Gi的结合对于MCP-1发挥作用是至关重要的。MCP-1 信号传导下游介质包括Ca2+、PKC、MAP激酶、PI3K、Rho GTP酶。MCP-1 和其他多种配体如MCP-2、MCP-3、MCP-4和小鼠MCP-5 共同分享CCR2受体诸多动物模型体内研究表明MCP-1在炎症反应过程中发挥重要作用。封闭MCP-1/JE活性,可抑制内毒素血症模型、迟发型过敏反应、炎性关节炎;而过量表达则可增强募集单核细胞和淋巴细胞。MCP-1在多种癌症中表达上调,包括胃癌、食管鳞癌、脑恶性胶质瘤、卵巢癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌等。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠MCP-1抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠MCP-1会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠MCP-1抗体可与被酶标板捕获的小鼠MCP-1结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠MCP-1抗体+小鼠MCP-1+生物素化抗小鼠MCP-1抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠MCP-1浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠MCP-1的浓度。

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