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Mouse IL-5 ELISA Kit

时间:2016-10-27 04:58:41来源:本站 作者:admin 点击:308次


【项目简介】
白细胞介素-5(IL-5),又称为T细胞替代因子,B细胞生长因子II,嗜酸性粒细胞分化因子,以及嗜酸性粒细胞集落刺激因子,人IL-5主要由活化T细胞产生,小鼠IL-5主要由Th2亚群细胞产生。小鼠IL-5 cDNA编码133个氨基酸残基,包括21个氨基酸的信号肽,信号肽裂解后形成含112个氨基酸残基的成熟序列,天然小鼠IL-5通常以二硫键连接形成同型二聚体,是个分子量为40-45 kDa的糖蛋白。成熟的小鼠IL-5与人的IL-5氨基酸同源性约70%,且在生物学上有交叉反应,小鼠和人IL-5对人细胞系有相同活性作用,而人IL-5在小鼠细胞中的活性比小鼠IL-5低。IL-5是一种多效细胞因子,它能促进小鼠细胞增殖和分化,提高IgM,IgG1,IgA和IgE的分泌,还能作为化学引诱物,延迟成熟嗜酸性粒细胞存活,刺激小鼠嗜酸性粒细胞的功能,诱导嗜酸性粒细胞的分化,并且和各种集落刺激因子发生协同作用,增加嗜酸性粒细胞产生和扩张。由于其对嗜酸性粒细胞的多种作用,IL-5与哮喘和其它嗜酸性粒细胞增多相关疾病的发病机理密切相关。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠IL-5抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠IL-5会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠IL-5抗体可与被酶标板捕获的小鼠IL-5结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠IL-5抗体+小鼠IL-5+生物素化抗小鼠IL-5抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠IL-5浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-5的浓度。


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