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Human GM-CSF ELISA Kit

时间:2016-07-18 01:51:40来源:本站 作者:admin 点击:389次


【项目简介】
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一种多效性细胞因子,能对造血细胞产生多种效应。GM-CSF能调动CD34+前体细胞进入外周,并刺激其增殖、分化为中性粒细胞、单核/巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和髓系树突状细胞。此外,研究表明GM-CSF亦能刺激红系细胞和巨核前体细胞增殖与分化。多种细胞可产生GM-CSF,包括角化细胞、成熟及未成熟NK细胞、II型肺泡细胞、内皮细胞、单核细胞、骨髓间叶干细胞、CD4+ 及CD8+ T 细胞、巨核细胞、B细胞、嗜酸性粒细胞和成纤维细胞。人GM-CSF的cDNA编码144个氨基酸残基前体蛋白,包括一个推测的17个氨基酸残基的信号肽与一个127个氨基酸残基的成熟蛋白。成熟的人GM-CSF氨基酸序列与小鼠、大鼠和犬科动物的GM-CSF氨基酸序列分别具有55%、63% 和 68%的同源性。人GM-CSF对小鼠细胞无活性,但有研究报道对犬科动物细胞有一定的活性。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人GM-CSF抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的人GM-CSF会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗人GM-CSF抗体可与被酶标板捕获的人GM-CSF结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗人GM-CSF抗体+人GM-CSF+生物素化抗人GM-CSF抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,人GM-CSF浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人GM-CSF的浓度。


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