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Human sCD40 Ligand ELISA Kit

时间:2016-10-27 03:54:13来源:本站 作者:admin 点击:238次


【项目简介】
CD40 配体(CD40L,CD154,gp39) 是分子量为33kD的II型跨膜糖蛋白,属肿瘤坏死因子(TNF) 超家族, 以三聚体的形式表达于活化的CD4 +T 淋巴细胞和活化的血小板表面。作为T、B 淋巴细胞活化的主要共刺激分子, CD40/CD40L 信号途径参与细胞和体液免疫应答, 并在免疫调控中发挥作用。活化的CD4+T 淋巴细胞和血小板表面膜型CD40L 经蛋白质水解作用形成分子量为18kD的可溶性CD40配体分子( sCD40L) , 可能是血清sCD40L的主要来源。研究已证实, 血清sCD40L水平与血小板数量呈正相关, 如原发性血小板增多症患者血清sCD40L水平较高, 而某些自身免疫疾病如系统性红斑狼疮患者其血小板数量正常, 血清sCD40L 浓度亦明显高于正常水平, 由此推测sCD40L也可能来源于CD4+T 淋巴细胞, 其机制有待于进一步阐明。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人sCD40 Ligand抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的人sCD40 Ligand会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗人sCD40 Ligand抗体可与被酶标板捕获的人sCD40 Ligand结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗人sCD40 Ligand抗体+人sCD40 Ligand+生物素化抗人sCD40 Ligand抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,人sCD40 Ligand浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人sCD40 Ligand的浓度。


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