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Human TIMP-1 ELISA Kit

时间:2016-10-27 03:53:26来源:本站 作者:admin 点击:210次


【项目简介】
人TIMP-1属于TIMPs(tissue inhibitor of metalloproteinases金属蛋白酶组织抑制剂)家族成员之一,人TIMP-1是具有184个氨基酸残基的糖基化蛋白,然而糖基化并不是其发挥活性做必须的。TIMP-1有12个半胱氨酸(TIMPs的保守序列)以二硫键的形式形成明显的N-端和C-端区域。N-端区域包含与MMP substrate结合的位点,C-端区域可结合MMPs的外部位点,增强总体亲和力,TIMP-1与非活化的MMP-9前体蛋白亲和力非常高。TIMP-1可由多种组织和细胞合成,TIMP-1基因的转录由促炎因子(IL-1,IL-6,OSM,LIF和TNF-alpha),TGF-beta1和佛波酯诱导。TIMP-1的许多生物学功能都与MMPs的功能密切相关。TIMP-1与MMPs的平衡被打破后就会出现关节炎、肿瘤生长和转移等病理情况。另外,TIMP-1可增强红细胞的活性,抑制B细胞的凋亡。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人TIMP-1抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的人TIMP-1会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗人TIMP-1抗体可与被酶标板捕获的人TIMP-1结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗人TIMP-1抗体+人TIMP-1+生物素化抗人TIMP-1抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,人TIMP-1浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人TIMP-1的浓度。


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