【项目简介】
TNF-α，也称为TNFSFIA，是肿瘤坏死因子家族的成员，在炎症反应与细胞凋亡中发挥重要作用。初始合成时是分子量为26KD由233个氨基酸组成的II型跨膜蛋白质，包含30个氨基酸组成的胞内区，26个氨基酸组成的跨膜区，以及177个氨基酸组成的胞外区。TNF-α胞内通过非共价的连接形成跨膜的同源二聚体。通过TNF-α转换酶（TACE）的作用，丛跨膜区C端释放出一个由157个氨基酸组成的可溶TNF-α （s TNF-α）。目前，已知表达TNF-α的细胞有：B细胞、结肠柱状上皮细胞、NK细胞、CD3+CD56+肝自然T细胞，巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞、CD4+ CD8+ T细胞、肥大细胞、嗜中性粒细胞、角化细胞和脂肪细胞等。同时，TNF-α能诱导IL-1、IL-6、IL-8、IFN-γ、GM-CSF等细胞因子的产生。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人TNF-α单抗，当加入标准品、待测样本和生物素化的抗人TNF-α抗体，经过孵育，标准品和样品中含有的TNF-α可同时与酶标板的包被抗体和生物素化的检测抗体相结合。洗板后，游离的其他成分被洗去，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，生物素和链霉亲和素特异性结合，形成“包被单抗+人TNF-α+生物素化抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后，复合物上连接的HRP催化底物反应，生成蓝色产物，终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值，人TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人TNF-α的浓度。

【操作流程】