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Human IFN-γ ELISA kit

时间:2016-07-16 03:54:05来源:本站 作者:admin 点击:281次


【项目简介】
IFN-γ的主要由活化T细胞产生,在小鼠中,由Th1亚群产生。当抗原、PHA或ConA刺激后T细胞分泌IFN-γ,通常与IL-2的产生一致。此外,活化NK细胞也可以产生IFN-γ。人和小鼠IFN-γ基因分别定为于12号和10号染色体上,在DNA水平上IFN-γ基因与IFN-α/β基因无同源性。人和小鼠IFN-γ在DNA水平上有65%左右同源性,在氨基酸水平上有40%左右。小鼠成熟IFN-γ分子由133个氨基酸组成。人IFN-γ成熟分子是由143个氨基酸组成的糖蛋白,以同源双体形式存在,分子量40KD,其生物学作用有严格的种属特异性,人IFN-γ只作用于人或灵长类动物的细胞。IFN-γ诱导单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等MHCII类抗原的表达,使其参与抗原递呈和特异性免疫的识别过程。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人IFN-γ单抗,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的人IFN-γ会和该单抗结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗人IFN-γ多抗可与被酶标板捕获的人IFN-γ结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被单抗+人IFN-γ+生物素化多抗+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,人IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人IFN-γ的浓度。

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