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cAMP ELISA Kit

时间:2016-07-24 02:56:16来源:本站 作者:admin 点击:316次


【项目简介】
cAMP(Cyclic Adenosine monophosphate)“腺苷-3',5'-环化一磷酸”的简称。亦称“环磷酸腺苷”“环化腺核苷磷酸”,“腺苷一磷”。以微量存在于动植物细胞和微生物中。体内多种激素作用于细胞时,可促使细胞生成此物,转而调节细胞的生理活动与物质代谢。有人称其为细胞内的第二信使,而称激素为“第一信使”。是含氮类激素的第二信使,并不是固醇类激素第二信使,因为固醇类激素可直接过膜,进入细胞起作用。环腺苷酸之所以称为细胞内的第二信使,是由于某些激素或其它分子信号刺激激活腺苷酸环化酶催化ATP环化形成的。当细胞受到外界刺激时,胞外信号分子首先与受体结合形成复合体,然后激活细胞膜上的Gs一蛋白,被激活的Gs一蛋白再激活细胞膜上的腺苷酸环化酶(AC),催化ATP脱去一个焦磷酸而生成cAMP。生成的 cAMP作为第二信使通过激活PKA(cAMP依赖性蛋白激酶),使靶细胞蛋白磷酸化,从而调节细胞反应,cAMP最终又被磷酸二酯酶(PDE)水解成5’-AMP而失活。cAMP生成和分解过程依赖 Mg2+的存在。AC和PDE可以从两个不同方面调节细胞内cAMP浓度,从而影响细胞、组织、器官的功能。当AC的活性升高时,cAMP浓度升高,当PDE浓度增高时,cAMP浓度降低。PDE对CAMP的调控,不仅取决于PDE的活化、抑制因素,还取决于细胞内PDE的组成、亚细胞分布。另外,与肿瘤有一定的关系,正常细胞和肿瘤细胞中的cAMP含量是有差异的,在肿瘤细胞内cAMP一般低于正常细胞水平。
 
【检验原理】
本试剂盒采用竞争ELISA法。首先包被亲和素-生物素化抗cAMP抗体酶标板,然后加入待测样本、辣根过氧化物酶标记的cAMP,使之形成包被亲和素-生物素化抗cAMP抗体+cAMP-HRP复合物,标记cAMP的结合量与样品中的cAMP量成反比。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,cAMP浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中cAMP的浓度。

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