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Bradford蛋白定量检测试剂盒 PD001

时间:2018-01-13 04:09:22来源:本站 作者:admin 点击:401次

产品编号 产品名称 试剂组成 包装
PD-001 Bradford蛋白定量试剂盒 G-250染液 100ml×2 1000次
蛋白标准品(5mg BSA/安瓿)


产品信息:
Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成,实现了快速、稳定和高灵敏度的蛋白浓度测定。其原理是考马斯亮蓝G-250在酸性条件下和蛋白质结合,使染料最大吸收峰从465n移至595nm处,在一定的线性范围内595nm的吸光度A值变化量与反应蛋白亮成正比,测定595nm处的吸光值即可通过建立的标准曲线进行蛋白定量,该试剂盒灵敏度高,在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%,且只能用于分子量大于3KD的蛋白含量检测,含去垢剂的样品推荐使用百智生物生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(PD-002)。
 
保存条件:
考马斯亮蓝G-250染液2-8℃保存;蛋白标准品试剂C -20℃保存,半年有效。


注意事项:
1、G250染液使用前请颠倒3-5次,混匀。
2、蛋白标准品先添加1ml与待测样本一致的缓冲液、1×PBS或0.9%NaCl复溶后,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3、将G250染液回复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
4、需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台,最佳检测波长为595nm,并需96孔板。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
使用说明:
1、用1ml与待测样本一致的缓冲液复溶蛋白标准品,完全复溶后取10μl稀释至100μl ,使终浓度为0.5mg/ml。
   蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液溶解和稀释。 但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2、将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20μl。
3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中,加标准品稀释液到20μl。
4、各孔加入200μl G-250染液,室温放置3-5分钟。
5、用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。



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