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Rat RANTES ELISA Kit

时间:2016-10-27 05:01:44来源:本站 作者:admin 点击:316次


【项目简介】
RANTES,调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子,也称为CCL5, 属于趋化因子"CC"亚家族。RANTES 通过趋化白细胞并调控它们的功能,在炎症免疫应答中发挥重要作用。RNATES cDNA最初是通过抑制差减杂交法而鉴定出的T细胞特异性序列。RANTES对多种不同类型的细胞具有强的趋化作用,包括未刺激的CD4+/CD45RO+ 记忆性T细胞、活化的CD4+ T细胞、NK细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、单核细胞和小胶质细胞。除其趋化作用外,RANTES也能活化多种类型的细胞包括T细胞、单核细胞、中性粒细胞、NK细胞、树突状细胞和星形胶质细胞。T细胞的活化往往需要相对较高浓度的RANTES(1um),  依赖于与细胞表面氨基聚糖(GAGs)的凝集。目前已鉴定出4个RANTES 受体CCR1、CCR3、CCR4和CCR5,均为G蛋白偶联受体。RANTES活化可激活多条信号传导级联。比如在T细胞内,RABNTES可激活胞内Ca2+升高,活化FAK激酶、蛋白激酶A、PI3K激酶、Rho GTP酶和JAK/STAT 信号通路。巨细胞病毒蛋白US28 与CC趋化因子受体具有高度的同源性,可与RNATES结合。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗大鼠RANTES抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的大鼠RANTES会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗大鼠RANTES抗体可与被酶标板捕获大鼠RANTES结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗大鼠RANTES抗体+大鼠RANTES+生物素化抗大鼠RANTES抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,大鼠RANTES浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中大鼠RANTES的浓度。


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