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Mouse IL-8/KC ELISA Kit

时间:2016-07-19 02:29:45来源:本站 作者:admin 点击:286次


【项目简介】
小鼠KC小鼠角化细胞源性细胞因子(keratinocyte-derived Cytokine, KC),也称为CXCL1或N51, 最初是从成纤维细胞中作为PDGF诱导的即早基因(Immediate early gene)被鉴定出,其编码一个约8kDa的分泌蛋白。根据小鼠KC的蛋白质序列,其属于alpha(CXC)趋化因子家族。除有丝分裂原活化的成纤维细胞外,KC还能在细菌或LPS刺激的腹膜及肺巨噬细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞上诱导表达。研究表明糖皮质激素可抑制有丝分裂原对KC的诱导表达。小鼠KC的cDNA编码96个氨基酸残基的前体蛋白,N末端19个氨基酸残基经剪切产生77个氨基酸残基的成熟KC蛋白。小鼠KC的蛋白序列与另一个alpha趋化因子MIP-2具有63%的序列同一性。与其他alpha趋化因子类似,小鼠KC是中性粒细胞的强诱导剂和激活剂。小鼠KC和MIP-2的生物学活性是通过独特的小鼠IL-8受体来介导的。小鼠IL-8R与人IL-8Rß和IL-8Rα分别具有71%和68%的序列同一性。由于在小鼠中还没有鉴定到IL-8同源物,所以MIP-2和KC被认为在功能上与IL-8相似,在小鼠中作为主要的促炎症反应alpha-趋化因子。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠IL-8/KC抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠IL-8/KC会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠IL-8/KC抗体可与被酶标板捕获的小鼠IL-8/KC结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠IL-8/KC抗体+小鼠IL-8/KC+生物素化抗小鼠IL-8/KC抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠IL-8/KC浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-8/KC的浓度。


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