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Mouse Leptin ELISA Kit

时间:2016-07-19 02:41:22来源:本站 作者:admin 点击:295次


【项目简介】
Leptin是新近鉴定出的小鼠obese肥胖基因的蛋白产物。obese肥胖基因突变的小鼠,Leptin的合成受阻,出现肥胖和糖尿病以及代谢率和体温降低等症状。目前已从人类、猿、小鼠和大鼠等细胞中分离到编码leptin的cDNA克隆。人Leptin与小鼠Leptin的氨基酸序列具有84%的序列同一性。人Leptin的cDNA编码167个氨基酸残基,其中21个氨基酸残基作为信号肽而被剪切,产生146氨基酸残基的成熟蛋白质。研究发现Leptin的mRNA仅表达于脂肪组织。最近又克隆出与Leptin具高亲和力的受体(OB-R),该受体与gp130和G-CSF受体同源。OB-R的mRNA主要表达于脉络丛和下丘脑。OB-R亦被鉴定为B219的一种同工型蛋白,B219序列在原始造血细胞群和淋巴造血细胞系中至少以4种同工型表达。目前正对leptin在体重调节、造血及生殖等方面的作用进行广泛的研究。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠Leptin抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠Leptin会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠Leptin抗体可与被酶标板捕获的小鼠Leptin结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠Leptin抗体+小鼠Leptin+生物素化抗小鼠Leptin抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠Leptin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠Leptin的浓度。

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