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Mouse IL-23 ELISA Kit

时间:2016-10-27 04:55:26来源:本站 作者:admin 点击:191次


【项目简介】
白细胞介素23(IL-23)为异二聚体细胞因子,与 IL-12相关。它是由两个二硫键相连的亚基组成,p19亚基(19kDa)为IL-23所独有,而p40亚基(40kDa)则与IL-12共享。小鼠p19的cDNA编码196个氨基酸的前体分子,具有一个推测的21aa的信号肽,成熟的蛋白具有175个氨基酸残基,与单链细胞因子IL-6家族的结构相似。 小鼠p40亚基的cDNA编码335个氨基酸残基前体分子,具有一个推测的22aa信号肽。成熟蛋白含313个氨基酸残基,具有4个可能的糖基化位点。成熟的小鼠p19和p40亚基与大鼠相应的亚基分别具有88%和92%的序列同一性。IL-23由活化的巨噬细胞、小胶质细胞以及树突细胞来源的单核细胞在应答病原体如某些细菌、病毒及其组分时,所表达产生的。极化的T细胞也表达P19亚基,但不表达p40亚基。功能性的IL-23受体复合体由两个亚基组成,即IL-12受体β1亚基(IL-12Rβ1)和IL-23特异性受体亚基(IL-23R)。IL-12Rβ1是一个738aa的I型跨膜糖蛋白,其胞外区含WSXWS基序和5个纤维连接蛋白三型结构域,IL-23R为644aa的I型跨膜糖蛋白。IL-23启动的信号传导级联反应与IL-12信号级联相似,涉及Jak2, Tyk2, STAT1, STAT3, STAT4及STAT5。
 
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗小鼠IL-23抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠IL-23会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗小鼠IL-23抗体可与被酶标板捕获的小鼠IL-23结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗小鼠IL-23抗体+小鼠IL-23+生物素化抗小鼠IL-23抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠IL-23浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-23的浓度。


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