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Human IL-1α ELISA Kit

时间:2016-10-27 03:57:46来源:本站 作者:admin 点击:299次


【项目简介】
人白介素1(IL-1)可分为IL-1α和IL-1β,其氨基酸序列同源性为25%,并且可识别相同的细胞表面受体。IL-1α和IL-1β都首先形成31kDa的前体蛋白,切割掉信号肽后形成约17.5kDa的成熟蛋白。大部分未被加工的IL-1α以前体肽的形式存在于细胞内,小部分未被加工的IL-1α被转运到细胞表面,这些细胞膜相关性未加工的IL-1α是具有生物活性的。IL-1α和IL-1β通过与其受体结合发挥生物学效应,目前发现的IL-1受体有IL-1受体I型(IL-1 RI)和IL-1受体II型(IL-1 RII)。IL-1 RI为80kDa的膜结合受体蛋白,属于Ig超家族成员,存在于T细胞、成纤维细胞、角质细胞、内皮细胞、滑膜衬里细胞、软骨细胞和肝细胞。总体来讲,IL-1α与IL-1 RI的亲和力较强而IL-1β与IL-1 RII的亲和力较强。IL-1具有广泛的生物学活性,IL-1可诱导内皮细胞和平滑肌细胞合成前列腺素。IL-1对免疫细胞也有广泛作用,如可作用于单核/巨噬细胞,诱导自身合成和TNF、IL-6的产生;可活化T细胞,导致IL-2的产生和IL-2受体的表达;可诱导B细胞增殖和成熟等。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有抗人IL-1α抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的人IL-1α会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的抗人IL-1α抗体可与被酶标板捕获的人IL-1α结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被抗人IL-1α抗体+人IL-1α+生物素化抗人IL-1α抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,人IL-1α浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人IL-1α的浓度。


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